上海博訊發現根據研究證明,植物內生真菌數量巨大,種類繁多,分布廣泛,其次級代謝產物具有多種生物活性。本文上海博訊醫療生物儀器股份有限公司以紫薯和麻黃為材料,采用組織分離法,分離內生真菌,并根據菌落形態和顯微形態進行形態學鑒定,為后續實驗提供材料。
1 實驗儀器
超凈工作臺,杭州凈化設備廠;手提式高壓滅菌鍋,上海博訊醫療生物儀器股份有限公司;生化恒溫培養箱,上海博訊生物儀器股份有限公司;電子分析天平,梅特勒儀器上海有限公司。
2 形態特征
結果顯示:菌落的特征各不相同,菌落顏色有白色、黑色、紫色、粉色等多種顏色;菌落形態有絨毛狀、鏈狀、絮狀等;有些菌落邊緣整齊,有些爬壁;有些產色素,基質顏色也會變化。植物組織的選擇植物內生真菌分離的過程中,植物的自然環境、季節、地區、部位的不同都會影響到該植物內生真菌的數量和種類,為保證分離得到的是內生真菌而不是植物的病原菌或表面的附生菌,一定要選取健康植物;為避免內生真菌受宿主植物的影響,要在釆集后的一周之內將植物的內生真菌分離。
表1紫薯內真菌形態的特征
3 植物組織的表面處理
表面消毒的時間、試劑濃度等因素對內生真菌的分離都會產生一定的影響。消毒的時間短、試劑的濃度低不僅不能完全分離出內生真菌,且分離得到的菌株也并非是內生真菌,很有可能是表面的附生菌,同時還會抑制內生真菌的生長;滅菌時間長、試劑的濃度高,雖然能夠達到滅菌的目的,但是滅菌的力度過大,也會將分布于表皮下的內生真菌殺死。內生真菌鑒定結果對株產孢的紫薯內生真菌鑒定結果顯示,其中赤霉屬株、鏈格孢屬株、聚孢霉屬株;麻黃株產孢菌中,鏈格抱屬株、青霉屬株、聚抱霉屬株、頭抱霉屬株、單梗頭抱霉屬株、鞭孢霉屬株。對不產孢的菌株將在以后的研究中,通過各種誘導方法使其產孢,并再進行鑒定。