在肉制品加工過程中,通常會加入一種食品添加 劑亞硝酸鹽,亞硝酸鹽的添加可以不僅改善肉制品色 澤,增進肉制品的風味,同時可以起到一定的抑菌的 作用,可以有效抑制肉制品中肉毒梭狀芽孢桿菌的生 長,防止肉制品腐敗變質從而達到延長食品保藏期的效果。
葡萄、黃檸檬、青檸檬、石榴、菠蘿、木瓜:市購。
檸檬酸鈉、濃鹽酸、亞硝酸鈉、二甲胺鹽酸鹽、碳酸 鈉、1-萘胺、無水對氨基苯磺酸(均為分析純):天津市 風船化學試劑科技有限公司。
T6-1650E 紫外分光光度計:北京普析通用儀器有 限責任公司;DZKW-S-4 電熱恒溫水浴鍋:上??坪?實業發展有限公司;Z36HK 高速冷凍離心機:賀默(上 海)儀器科技有限公司;A11 艾卡分析用研磨機:艾卡 (廣州)儀器設備有限公司;博迅BSC-1000A2生物安全柜;KQ-500DE 數控超聲波清洗器:昆山市超聲儀器有限公司。
參考宋爽等的研究結果,用直接榨汁法提取的 果蔬汁液對亞硝酸根的清除效果優于超聲法和水浴 法。因此選用直接榨汁法制取新鮮果汁:新鮮水果挑 選→去除果皮和籽→切成小塊→清洗→榨汁機榨 汁→離心→取上清液作為提取液→4 ℃冷藏備用。
當加入提取液時,提取液與亞硝酸鈉作用將部分 亞硝酸鈉消耗掉,剩余亞硝酸根在酸性條件下,可以 是對氨基苯磺酸重氮化,再使其與 1-萘胺偶合生成紅 色化合物,用分光光度計測出該化合物的吸光度值可 計算上述反應液中亞硝胺含量。
取 10 mL 離心管,加入 0.1 mL 提取液,5 mL, 0.5 mol/L 的 pH 值為 3.0 的檸檬酸鈉-鹽酸緩沖液,再 加入 0.5 mL,1 mmol/L 的亞硝酸鈉,將反應體系用緩沖 液定容到 10 mL,在 37 ℃條件下保溫反應 30 min,取 1 mL 于 5 mL 試管中加入 1 %對氨基苯磺酸和 0.1 % 的 1-萘胺各 1.5 mL,定容至 5 mL,放置 15 min 顯色后 在波長 525 nm 比色測定其吸光度。
用已得到的葡萄、黃檸檬、青檸檬、石榴、菠蘿、木 瓜 6 種天然產物提取液進行不同質量分數提取液對亞 硝酸鹽清除率的測定。加入各提取液的添加量分別 0、 0.1 %、0.5 %、1 %、5 %、10 %、20 %時,按上述操作步驟 進行測定,并計算各個質量分數下提取液的阻斷率, 進行分析。
在單因素試驗的基礎上,設計正交試驗,選擇黃 檸檬、菠蘿、木瓜 3 種天然產物進行復配,得到 9 組不 同提取液濃度組合的復配試驗組。具體正交試驗設計 因素水平設計見表 1。
不同質量分數的各種天然產物提取液對亞硝酸 鹽的清除率如圖 1 所示。
由圖 1 可見,菠蘿提取液質量分數在 0 %~1 %范圍 內變化時,對 N-亞硝胺的阻斷率范圍為 0 %~52.1 %, 且當其質量分數達到 1 %時,阻斷率最高達到了 52.1 %。 當質量分數繼續升高時,阻斷作用有趨于平緩逐漸減 小的趨勢。同樣,黃檸檬、木瓜、青檸檬、石榴、葡萄提 取液均在質量分數為 1 %時達到最佳阻斷效果。同時 由圖 1 可以看出,菠蘿清除亞硝酸鹽的效果最明顯,其 次是黃檸檬和木瓜。這 3 種天然產物提取液對亞硝酸 鹽清除率始終高于青檸檬、石榴和葡萄,由此根據單 因素試驗篩選出菠蘿、黃檸檬、木瓜這 3 種清除亞硝酸 鹽效果較強的天然提取物,且根據單因素試驗結果可 知,清除亞硝酸鹽最佳質量分數為 1 %。9 個處理中直觀地找出最優水平組合為 5 號處 理,即 A2B2C1,試驗指標值為 79.5 %;通過正交試驗結 果的統計分析,得出最優水平組合為 A2B2C1,與選出的 5 號處理結果吻合。經進一步試驗檢驗得出,最優水平 組合為 A2B2C1,即黃檸檬提取液質量分數為 1.0 %,菠 蘿提取液質量分數為 1.0 %,木瓜提取液質量分數為 0.8 %,混合果汁對亞硝酸鹽清除效果最好,清除率為 79.5 %,比單因素試驗中最高清除率 52.1 %(菠蘿)明 顯提高,天然產物提取液復配得到的果汁對亞硝酸鹽 清除效果最理想。
通過清除亞硝酸鹽的最佳復配比正交試驗,得到 的最優復配組合為 1.0 %黃檸檬提取液、1.0 %菠蘿提取 液、0.8 %木瓜提取液混合,清除率為 79.5 %,天然產物 提取液復配得到的果茶汁對亞硝酸鹽具有理想的清 除效果;而通過阻斷亞硝胺合成的正交試驗,得到的 最優復配組合為 12 %黃檸檬提取液、8 %菠蘿提取液、 10 %木瓜提取液混合,阻斷率為 51.1 %,有較好的阻斷亞硝胺合成效果。復配天然產物應用到肉類產品的 生產中不僅能起到清除亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺合成 的效果,還能增加產品的營養和風味。這為開發更加 安全美味的肉類食品的開發提供了參考。
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