材料與方法
大容量多孔離心機(LXJ-ⅡB):上海安亭科學儀 器廠;壓力蒸汽滅菌鍋(LS-3D)、生化培養箱(SPX250B-Z)、振蕩培養箱(SPX-250B-D):上海博迅實業有限公司;高效液相色譜(1200):美國 Agilent;pH 計 (pH-3C):上海佑科儀器儀表有限公司;雙人凈化工作 臺(SW-CJ-2D):浙江蘇凈凈化設備有限公司;生物顯 微鏡(DM1000):德國 LEICA;電泳儀(DYY-11):北京 市六一儀器廠;PCR 儀 (2720)、DNA 測 序 儀(3730 XL):美國 ABI。?。?±0.2)g 土壤裝入錐形瓶,加入 100 mL 無菌生 理鹽水。錐形瓶中加入玻璃珠后放入搖床振蕩 20 min, 待靜置分層后取上清液涂于固體培養基,于 28 ℃恒溫 培養箱培養 3 d 后,取長勢較好的幾株菌落再次平板 劃線培養,將菌株進行純化,最后進行斜面保存與甘 油保存。
結論
從山葡萄生長的土壤中篩選得到 8 株具有降解有 機酸效果的菌株,篩選出一株降酸效果最佳的菌株 S4,對于酒石酸、蘋果酸、檸檬酸降解率分別為(71.90± 0.27)%、(86.33±0.53)%、(72.77±0.46)%。經多次傳代 后,其降酸率下降,但可穩定在酒石酸降解率為 (20.13±0.27)%,蘋果酸降解率為(18.38±0.92)%,檸 檬酸降解率為(11.85±0.55)%。通過形態及分子生物 學鑒定該菌株為草酸青霉(Penicillium oxalicum)。該菌 株最適接種量為 3 %,最適生長溫度為 28 ℃,最適生 長 pH 值為 3.0,最適生長轉速為 150 r/min。其對 SO2 耐受性 > 質量濃度 500 mg/L,對酒精耐受性 > 體積分 數 12 %,致死溫度為 60℃~65 ℃,20 min ~30 min。