高密度發酵培養基研制

材料與方法

YXQ- LS- 50SⅡ型立式高壓蒸汽滅菌鍋，上海 博迅實業有限公司醫療設備廠；SW- CJ- 1F 型超凈 工作臺，蘇州安泰空氣技術有限公司；AG050 型， 厭 氧 培 養 罐 ： 廣 州 雷 得 生 物 技 術 有 限 公 司 ； SE6001FZH，電子天平美國奧豪斯公司；MEI04E 型，分析天平梅特勒托利多公司；PHS- 3C 型，pH 計上海儀電科學儀器股份有限公司；LRH- 250 型， 生化培養箱上海一恒科學儀器有限公司；MX- S 型， 旋渦振蕩器美國賽洛捷克公司。改良 MRS 液體培養基：葡萄糖 2%、蛋白胨 1% 、 酵 母 膏 0.5% 、 牛 肉 膏 1% 、 磷 酸 氫 二 鉀 0.12%、檸檬酸銨 0.26%、硫酸鎂 0.058%、硫酸錳 0.005%、吐溫 80 0.15%、L- 半氨酸鹽酸鹽 0.1%。

結果與分析

單因素試驗結果表明，分別按 2% （乳糖和葡 萄糖各 1%） 添加不同碳源、按 1% （蛋白胨和胰蛋 白胨各 0.5%） 添加不同氮源、按 3% （麥芽濃縮汁 和玉米漿各 1.5%） 添加不同生長因子的增菌效果不 同。其中乳糖作為碳源增菌效果最好，培養 12 h 活 菌數為 1.9×109 CFU/mL；胰蛋白胨為增菌效果最 好的氮源，培養 12 h 活菌數為 1.53×109 CFU/mL； 玉米漿為增菌效果最好的生長因子，培養 12 h 活 菌數為 1.84×109 CFU /mL。因此選擇乳糖、胰蛋白 胨和玉米漿為增菌培養基的碳源、氮源和生長因 子，20 g/mL 乳糖、10 g/mL 胰蛋白胨和 30 g/mL 麥 芽汁為響應面試驗的因素低水平取值。由 方 差 分 析 表 可 知 ， 模 型 有 統 計 學 意 義 （F=26.64，P<0.05），調整 R2 為 0.936 9，說明菌數 的變化 93.69%是由所選因素引起的。本模型中信噪 比值為 16.053，說明了模型的充分性和合理性。

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