柿子樹為柿科柿屬落葉大喬木,生長在熱帶和溫 帶地區。我國是柿子樹的主要種植區,柿子年產量占 全世界的50%以上,主要分布于陜西、山東、河南等地。柿子營養豐富,產量巨大,有數據表明,2016年我 國柿子產量達396萬噸。柿子成熟后不易長期保存, 除鮮食外,大部分被進一步深加工制成柿餅、柿干、濃縮柿子汁等。柿皮是柿子深加工過程中的主要副產物, 約占柿子重量 的10%,近 年 來,隨著柿子產業的快 速發展,因大量的柿皮未被有效地處理而對環境造成 了較為嚴重的污染,越來越被大家重視。研究表明,柿 皮中含有較多的多酚、膳食纖維、果膠物質、單寧以及 類胡蘿卜素等活性成分,具有進一步開發的潛力。 綜合利用柿子皮,不僅可以提高柿子加工產品的附加 值,而且可以實現柿子加工副產物的減量化和資源化, 對于環境保護具有重要意義。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
柿皮:由富平永輝現代農業柿子產業園提供。 β-胡 蘿 卜 素 標 準 品、1,1-二 苯 基-2-三 硝 基 苯 肼 (DPPH)、ABTS 二 胺 鹽:上 海 源 葉 生 物 科 技 有 限 公 司;碳酸氫二鈉、石油醚、碳酸二氫鈉、鐵氰化鉀、乙酸 乙酯、抗壞血酸、無水乙醇、30%雙氧水、三氯化鐵:天 津科密歐化學試劑有限公司;丙酮、水楊酸:國藥集團 化學試劑有限公司;以上試劑均為分析純。
1.2 儀器與設備
FA1004N 型電子分析天平 上海上天精密儀器 有限公司;UV-1100型紫外可見分光光度計 上海美譜達儀器有限公司;600型電熱恒溫水浴鍋 北京 科 偉永興儀器 有 限 公 司;RE52CS-1型 旋 轉 蒸 發 儀 上 海亞榮生化儀器廠;KH5200DE 型超聲波清洗器 昆山禾創超聲儀器有限公司;博迅GZX-9246MBE型 電 熱 鼓 風干燥箱 上海博迅實業有限公司醫療設備廠。
1.3 試驗方法
1.3.1 原料預處理
將新鮮 柿 皮 冷 凍 干 燥,取 出 切 成 小 塊,粉 碎 過 20目篩,備用。
1.3.2 β-類胡蘿卜素標準曲線的繪制
精確稱取β-胡 蘿 卜 素 標 準 品 5 mg,溶 解 于 丙 酮 中,定容至100mL,制備成濃度為50μg/mL 的β-胡蘿卜素標準液。分別吸?。?,10,15,20,25mL標準液 至50mL容量瓶中,用丙酮定容,制備成濃度分別為5, 10,15,20,25μg/mL的標準工作液,在450nm 處測量吸 光值,并繪制標準曲線。得回歸方程為 Y=0.0227X+ 0.0048,R2=0.9996,線性關系良好。
2 結果與分析
不同提取溶劑對類胡蘿卜素提取效 果的影響較為明顯,以無水乙醇作提取溶劑時,柿皮類 胡蘿卜素含量最高;當乙酸乙酯作為提取溶劑時,柿皮 類胡蘿卜素含量最低。這是因為類胡蘿卜素在不同的 溶劑中具有不同的溶解度,因此提取效果也各不相同。 無水乙醇作為常用溶劑,具有安全、成本低、粘性小、易 回收等優點。因此,合適的提取溶劑為無水乙醇。溫度逐漸升高,柿皮類胡蘿卜素含量 先增加后減小。當溫度升高至50℃時,類胡蘿卜素含 量達到最大。溫度越高,分子熱運動越快,類胡蘿卜素 溶解速率越快,但溫度過高,含量下降,這可能是由類 胡蘿卜素的不穩定性引起的,導致類胡蘿卜素活性喪 失,乙醇的蒸發速率增加且能量消耗增加。綜合考慮, 選取的超聲溫 度 為50 ℃,隨后的響應面優化試驗在 40~60 ℃范圍內進行。
3 結論
響應面優化出柿皮中類胡蘿卜素的最佳提取工藝 為:超聲功率100 W,提取溶劑為無水乙醇,提取溫度 60℃,提取時間30min,液料比40∶1 (mL/g),進行 驗證試驗,測得含量為2.58mg/g,與理論計算柿皮中 類胡蘿卜素的最大提取含量2.63mg/g比較,誤差僅 為1.9%,具有實用價值。體外抗氧化試驗結果表明, 當柿皮類胡蘿卜素濃度為50μg/mL 時,DPPH 自 由 基的清除率為96.48%,略高于 Vc;對 ABTS+ 的清除 率達93.35%,與 Vc相當;50μg/mL柿皮類胡蘿卜素 對·OH的清除率達46.54%,顯著高于 Vc;50μg/mL 柿皮類胡蘿卜素對鐵的還原力為0.40,顯著高于 Vc, 說明柿皮類胡蘿卜素具有較強的體外抗氧化活性。
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