上海博迅醫療生物儀器股份有限公司對銀耳的深層培養搖瓶生產方法進行了研究 , 簡單方法介紹如下 :
1、儀器設備:不銹鋼小鏟50支,玻璃吸管( 10ml ) 5支,三角燒瓶 ( 500ml) 500只,上海博迅超凈工作 臺(單人 ) 1臺,上海博迅雙層大容量搖瓶機(旋轉式220轉/分鐘) 5臺,芽抱含量用血球計數板計數;測pH用25型酸度計;測總塘和還原糖用裴林氏法,測氨基氮用甲醛法;測銀耳搪 (抱外)含量用酚一硫酸法。
2、工藝流程試管種,種子瓶、發酵瓶、提取銀耳成品,具體時間、溫度、接種方法將在以下介紹:
培養基配方:斜面培養基 ( 腸 ) :馬鈴薯,蔗搪名;
種子:搖瓶培養基 ( 腸 ) ,馬鈴薯25、30( 可用淀粉、玉米漿代替 ) ,蔗糖;
發酵搖瓶培養基 ( 腸 ) : 玉米粉,蔗糖,蛋白等。
培養基配制:種子搖瓶,馬鈴薯洗凈、去皮、切成小塊,煮30分鐘,用兩層紗布過濾,取濾液加入其他成份,溶解后加水至要求體積,分裝人500ml三角瓶 , 按常規包扎、消毒、待接種。
發酵搖瓶按配方準確稱量培養基各成份 , 加水溶解至要求體積,分裝500ml三角瓶,按常規包扎、消毒,待接種。
培養條件-種子瓶:用切塊法取斜面菌種接入種子搖瓶,置上海博迅旋轉式搖床 (220rpm ) 上 , 在28℃下培養48小時。
發酵搖瓶:用吸管將種子瓶中的培養液按5腸接種量接入發酵瓶, 置上海博迅醫療生物儀器股份有限公司生產的旋轉式搖床(220rpm )上 , 在30℃下培養72小時。
放瓶標準 一般種子搖瓶、 發酵瓶是以培養時間為培養周期,但一 定要達到下列標準:
種子瓶放瓶標準:芽抱含量每毫升達15億個以上,粘稠度明顯增加 , 比消毒后增加2、3倍 (用自制的粘度計為準) ;PH6.5、7.5總糖。7-1.10腸;還原搪0.05;氨基氮,銀耳糖3000r/ml以上。
發酵瓶放瓶標準: 芽抱含量每毫升10、15億個左右;pH6.5~7.5;總;還原塘。氨基氮;銀耳搪6000r/ml以上。
銀耳多糖提取將發酵好的發酵液倒入容器中,煮沸3~ 4分鐘,迅速冷卻,量好體積,加適量氯化鈣,溶解后再用藥用酒精提取,靜置2~ 5小時,去掉上清液( 送去回收酒精,一般回收率達95腸以上 ) ,下層重液離心分離,濾講再用C.P級酒精洗滌、離心 濾餅為濕銀耳多糖,烘干過60目篩即為銀耳多糖粉,可供藥用或做食品添加劑,銀耳多糖成品為白色或淺黃、淺灰色。水溶液為膠體溶液pH7.08。
銀耳多糖深層培養 , 特別是采用搖瓶法,設備簡單 ( 只用 搖瓶機和一臺消毒鍋 ),見效快。歡迎大家咨詢采購上海博迅恒溫培養搖床。