牛傳染性鼻氣管炎( IBR) ,又稱壞死性鼻炎、紅 鼻病,是由牛傳染性鼻氣管炎病毒( IBRV) 引起牛 的一種急性、熱性、接觸性傳染病,是 OIE 規定的 B 類動物疫病,我國農業農村部( 原農業部) 將其定 為二類動物疫病。
1 材料與方法
1. 1 血清樣品
從西藏拉薩市、林芝市、日喀則市、昌都市、山南 市、那曲市和阿里地區等七個地區共采集未接種 IBR 疫苗的牦牛血清 300 份,其中拉薩市 30 份,其余 6 個 地區各 45 份。血清采回后-20 ℃ 保存,檢測前置于 室溫下自然解凍。
1. 2 主要儀器與試劑
酶標分析儀( 型號為 Rayto RT-6100) ,購自深圳 雷杜生命科學股份有限公司; 微量移液器( 型號為 dragon-lab) ,購自賽伯樂( 上海) 儀器有限公司; 優普 超純水制造系統,購自成都超純科技有限公司; 恒溫恒濕培養箱,購自上海博訊實業有限公司醫療設備廠; 冰箱,購自中科美菱低溫科技股份有限公司。 IBR 抗體酶聯免疫分析試劑盒、牛傳染性鼻氣管 炎抗原酶聯免疫分析試劑盒,均購自江蘇酶免實業有限公司。
1. 3 IBR 血清抗體、抗原的檢測
IBR 血 清 抗 體、抗原檢測嚴格按照酶聯免疫 ( ELISA) 分析試劑盒說明書方法操作。 結果判定: 陽性對照孔 OD450平均值≥1. 00,陰性 對照孔 OD450平均值≤0. 10 時,判定試驗成立; 陰性 對照孔平均值+0. 15 為臨界值; 樣品 OD450值<臨界值 時,判定 為 陰 性; 樣 品 OD450 值 ≥ 臨界值時判定為 陽性。
1. 4 數據的統計分析
采用 SPSS 19. 0 軟件對西藏各地區牦牛 IBR 血 清抗體陽性率進行顯著性分析,P>0. 05 差異不顯著, P<0. 05 差異顯著。
2 結果與分析
西藏七個地區牦牛血清樣品中 IBR 抗體、抗原 檢測結果見表 1。
從表 1 可見: 血清抗體平均陽性率為 11. 00% ( 33 /300) ,其中日喀則市和林芝市牦牛 IBR 血清抗 體陽性率最高,均為 17. 78%( 8 /45) ; 山南市最低,為 0( 0 /45) ; 血清抗原平均陽性率為 10. 00%( 30 /300) , 其中日喀則市牦牛 IBR 血清抗原陽性率最高,為 20. 00%( 9 /45) ; 山南市最低,為 2. 22% ( 1 /45) 。對 七個地區牦牛血清樣品 IBR 抗體、抗原陽性率進行 顯著性分析,結果表明,日喀則市和林芝市牦牛 IBR 血清抗體陽性率與昌都市、山南市差異顯著 ( P < 0. 05) ; 拉薩市牦牛 IBR 血清抗體陽性率與山南市差 異顯著( P<0. 05) 。日喀則市牦牛 IBR 血清抗原陽性 率與阿里地區、昌都市和山南市差異顯著( P<0. 05) , 拉薩市牦牛 IBR 血清抗原陽性率與山南市差異顯著 ( P<0. 05) 。
3 討論
自 1980 年周泰沖等首次從新西蘭進口至我 國的奶牛中分離到 IBRV 以來,我國各地均出現了 IBR 流行的報道,且部分地區流行情況較為嚴重, 而與西藏相鄰的新疆、青海、四川等省區 IBR 流行情 況也 令 人 堪 憂。胡 文 兵 等、李靜 等、劉潔 瓊 等分別于 2010 年、2012 年和 2016 年對新疆不同地區牛群的 IBR 感染情況進行調查,結果表明,抗體 陽性率分別為 36. 9%、82. 5%、80. 7%; 賀曉龍等、 沈艷麗等、韓照清等分別于 2009 年、2010 年和 2012 年對青海不同地區進行 IBR 流行情況調查,結 果表明,血清抗體陽性率分別為 47. 62%、19. 8% 和 44. 6%; 韓照清等、何美琳等于 2012 年、鄧宇 等于 2015 年在四川部分地區開展 IBR 流行情況 調查,結 果 表 明,血清抗體陽性率分別為 27. 9%、 77. 4%、35. 29%; 韓照清等2014 年在我國西部高 原地區的調查結果表明,西藏部分地區 IBR 血清陽 性率為 38. 6%、青海部分地區為 44. 6%、四川部分地 區為 27. 9%; 曲萍等對包括四川、青海、新疆等在 內的 11 個半農半牧區的 IBR 血清學調查結果表明, 2014—2016 年的血清陽性率分別為 51. 46%、 57. 16%和 50. 16%; 同時有資料顯示,與西藏相鄰的 印度阿魯納恰爾邦牦牛 IBR 血清抗體陽性率也高達 41%,而本次牦牛 IBR 血清抗體檢測結果明顯低 于西藏周邊各省份及地區。