銀杏葉為銀杏科植物銀杏(Ginkgo biloba L.)的 干燥葉,含有多種成分,如黃酮類、內酯類、多 糖類、酚類等,具有免疫調節、抗衰老、抗氧 化、抗炎、抗腫瘤、降血脂等生物活性。近年 來關于銀杏葉多糖的抗氧化活性研究表明,其對 DPPH自由基、羥自由基、超氧陰離子等具有較強 清除作用,又基于多糖類物質具有較好的吸 濕、保濕及營養肌膚等作用研究 ,提示銀杏葉多 糖在現代保健、護膚等產品開發方面具有一定的 潛在價值。
1 材料
1. 1 儀器
UV-1700雙光束紫外分光光度計[島津 企業管理(中國)有限公司];YB-P6智能透皮試驗 儀(天津藥典標準儀器廠);DL-720E超聲儀(上海 之信儀器有限公司);SC-3610低速離心機(科大創 新股份有限公司中佳分公司);S30-UV 實驗室純 水系統(上海和泰儀器有限公司);CP-225D 電子 天平(0.01 mg)(德國賽多利斯公司);ME-204電子 天平(0.000 1 g)(瑞士梅特勒—托利多公司); 博迅DZF-6050 真空干燥箱(上海博迅實業有限公司醫療設備廠)。
1. 2 試藥
銀杏葉(批號:魯 1702001),由江西 樟樹天齊堂中藥飲片有限公司提供,經北京大學 深圳醫院袁勁松主任中藥師鑒定,所用藥材符合 《中華人民共和國藥典》2015版要求。D-無水葡萄 糖對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號: 110833-201506)。其余試劑均為市售分析純。
1. 3 動物
SPF級健康SD大鼠,體質量(200±10)g, 由廣東省醫學實驗動物中心提供,動物質量合格 證號:SYXK(粵)2017-0125。
2 方法與結果
2. 1 銀杏葉多糖的制備
稱取銀杏葉干品100 g,先用石油醚提取至提取液無色,藥渣風干后加入 水加熱回流提取3次,1.5 h/次,過濾,濾液濃縮至 適量,加入氯仿和正丁醇溶液混合液(V∶V = 5∶1), 振蕩,反復多次除去變性蛋白質。在已脫蛋白溶 液中加入體積分數 95%乙醇調至終濃度為 80%, 4 ℃靜置24 h,抽濾,沉淀物依次用體積分數95% 乙醇、無水乙醇洗滌 2 ~ 3 次,真空干燥至恒質 量,得到粗多糖 8.36 g。再將粗多糖通過纖維素 柱,蒸餾水洗脫,Molish 反應檢測至洗脫液呈陰 性。合并洗脫液,濃縮至適量,用乙醇沉淀,4 ℃ 靜置24 h,抽濾,沉淀物依次用無水乙醇洗、丙酮 洗滌2 ~ 3次,真空干燥,得到多糖4.28 g(多糖含 量為2.94 g)。
2. 2 吸濕性能研究
于室溫(25 ± 1)℃,將飽 和醋酸鉀溶液、飽和碳酸鉀溶液和飽和硫酸銨溶 液分別放入干燥器內,控制相對濕度(RH)為 43%、60%、81%。準確稱取3份銀杏葉多糖、丙 三醇、海藻酸鈉,1.0 g/份,加入到直徑3 cm的稱 量瓶中,再分別放置于以上干燥器內,于 1、2、 4、8、12、16、24 h等不同時間點,測定樣品放置 前、后的質量(m0、mn),計算吸濕率: 吸濕率 (%)= 100(mn - m0)/ m0。同時,以吸濕率為縱坐 標、時間為橫坐標,繪制變化曲線,計算其趨勢 線斜率k,即為樣品的吸濕速率。 RH43%的環境中,各樣品在0 ~ 24 h內的吸濕 率高低依次為丙三醇>海藻酸鈉>銀杏葉多糖, 在24 h的吸濕率分別為81.2%、32.8%、27.5%。其 中,丙三醇的吸濕率上升速度最快(k = 9.434),而 海藻酸鈉(k = 3.088)與銀杏葉多糖(k = 2.634)則是 緩慢上升,且較為接近。吸濕率變化見圖1,趨勢 線見表1。
RH60%的環境中,各樣品在0 ~ 24 h內的吸濕 率高低依次為丙三醇>海藻酸鈉 ≈ 銀杏葉多糖, 在24 h的吸濕率分別為93.2%、35.7%、36.9%。其 中 , 丙 三 醇 的 吸 濕 率 上 升 速 度 依 然 最 快(k = 10.570),而海藻酸鈉(k = 3.292)與銀杏葉多糖 (k = 2.788)則 是 緩 慢 上 升 , 且 較 為 接 近 。 與 RH42%環境相比,各樣品吸濕率均有所增加。
3 討論
我國的銀杏葉產量占據世界的 90%以上,資 源十分豐富,且銀杏的葉、果和外種皮等部位均 含有多糖。本研究立足于銀杏葉多糖的保濕吸 濕、透皮吸收性能的評價,可為其在美容護膚方 面的應用提供依據,不僅可以更為顯著地提高銀杏 葉的資源利用率,而且還能創造更高的經濟價值, 更大地調動種植戶的積極性,具有重要的意義。
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