服務熱線：1751168309217511683092
服務熱線：1751168309217511683092
木姜葉柯 Lithocarpus litseifolius( Hance) Chun 為殼斗 科柯屬常綠植物，多分布在長江以南的低山密叢中， 藥 食兼 用 ，可 做 茶、糖、藥 。其 有 清 熱 利尿、滋肝 養 胃、化痰、祛風、降壓等功效，可用于治療濕熱痢疾、皮 膚瘙癢、肺熱咳嗽、高血壓等癥。近代醫學研究證明， 木姜葉柯具有抗氧化 、免疫抑制、降血糖等藥理 作用。三葉苷是其主要活性成分之一，具有抗糖尿病、 抗人類免疫缺陷病毒 ( HIV) － 1 感染 、抗炎等作用。
1 儀器與試藥
1．1 儀器
1260 型 高 效 液 相 色 譜 儀 ，包 括 G1311B 四 元 泵、 4212BDAD 型二極管陣列檢測器( 美國 Agilent 公司) ; AUW120D 型電子分析天平 ( 日 本 Shimadzu 公 司 ) ; Mighty － 10 型超純水機( 上海礫鼎水處理設備有限公司) ; BZF-50 型真空干燥箱( 上海博訊實業有限公司醫療設 備廠) ; 薄層色譜( 青島海洋化工廠) 。
1．2 試藥
三葉苷對照品( 四川省維克奇生物科技有限公司， 批號為 WKQ18052505，含量 ＞ 98． 0% ) ; 所用試劑均為 分析純，水為超純水。木姜葉柯藥材購自湖南省溆浦縣 君健中藥材專業合作社，經湖南醫藥學院蔡偉副教授鑒 定為正品。
2 方法與結果
2．1 提取、分離與結晶
取木姜葉柯藥材 0． 1 kg，用粉碎機稍加粉碎，過 2 號篩，置 2 000 mL 圓底燒瓶中，以 10 倍量水在 80 ℃ 條 件 下 提 取 3 次 ，每 次 1 h，得 殘 渣 和 濾 液 ，合 并 濾 液，于冰箱冷藏靜置 12 h，濾過，得黃色沉淀物，減壓干 燥( 55 ℃ ) 24 h，得三葉苷粗品。在無水乙醇溶液中緩慢 加入三葉苷粗品，邊加熱邊溶解，待三葉苷飽和溶解后， 冷卻溶解液得結晶，重復 3 次，干燥，得三葉苷純品。
2．2 水分測定
按 2015 年版《中國藥典(四部)》通則 0832 項下水 分測定法第二法( 烘干法) 測定三葉苷純品中的水分。取 三葉苷純品約 2 g，置干燥至恒重的稱量瓶中，精密稱 定，打開錐形瓶瓶塞，置 105 ℃干燥箱中干燥 5 h，移出， 并迅速蓋上瓶蓋，置干燥器中冷卻 30 min，精密稱定，繼續干燥 1 h，迅速取出，冷卻后稱定質量，連續 2 次干燥 后的質量差小于 5 mg 時停止干燥，根據損失的質量，計 算三葉苷純品中水分含量，重復 3 次。結果三葉苷純品 水分含量為(3． 550 ± 0． 163 )% 。
2．3 結構鑒定
白 色 針 狀 結 晶 。1 H － NMR ( 500 MHz，DMSO) δ: 7． 03( 2H，d，J = 8． 0 Hz，H － 2，H － 6) ，6． 66( 2H，d，J = 8． 0 Hz，H － 3，H － 5 ) ，6． 04( 2H，S) ，4． 88( 1H，d，J = 7． 71 Hz) ，5． 36( 1H，d，J = 5． 82 Hz) ，5． 13( 1H，d，J = 5． 42 Hz) ，2． 78( 2H，t，J = 7． 66 Hz，H － β) 。13 C － NMR δ: 131． 49( C － 1) ，129． 20( C － 2，C － 6) ，155． 42( C － 4 ) ， 115． 09( C － 3，C － 5) ，45． 77( C － α) ，29． 32( C － β) ， 205． 07( C O) ，105． 23( C － 1' ) ，163． 39( C － 2' ，C － 6') ，95． 07 ( C － 3'，C － 5') ，163． 74( C － 4') ，99． 52( C － 1″ ) ，73． 05( C － 2″ ) ，76． 41( C － 3″ ) ，69． 41( C － 4″ ) ， 77． 14( C － 5″) ，60． 48( C － 6″) 。以上數據與報道結果基本一致，故鑒定化合物為三葉苷。
2．4 薄層鑒別
取三葉苷對照品和三葉苷純品各適量，分別加甲醇 溶解制成對照品溶液和供試品溶液。按 2015 年版《中國 藥典( 四部) 》TLC 法試驗，吸取上述 2 種溶液各 10 μL， 分別點于同一硅膠 G 薄層板上，分別以石油醚 － 正丁 醇( 1 ∶ 8，V / V) 、乙酸乙酯 － 正丁醇( 2 ∶ 1，V / V) 、乙酸 乙酯 － 丙酮( 3 ∶ 2，V / V) 為展開劑，展開，取出，晾干，置 日光燈下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色 譜相應位置上顯相同顏色的斑點，詳見圖 1。
3 討論
三葉苷是木姜葉柯具有降糖活性的主要成分，對α － 葡萄糖苷酶有明顯抑制作用，與阿卡波糖效果相 當?，F有關于木姜葉柯中三葉苷提取、分離報道較 少，且大多采用乙醇水溶液進行提取。本試驗中以 水提取，相對于乙醇更環保。 傳統的重結晶溶劑多采用甲醇，毒性很大，在使用 過程中，對人體的神經系統和血液系統影響較大，經消 化道、呼吸道或皮膚攝入都會產生毒性反應，特別是甲 醇蒸氣對呼吸道黏膜和視力損傷很大。本試驗中采用乙 醇進行熱飽和結晶，得到三葉苷的純度高，污染小，水分 量小，經碳譜、氫譜、薄層色譜鑒定均為正品。
免責聲明：文章僅供學習和交流，如涉及作品版權問題需要我方刪除，請聯系我們，我們會在第一時間進行處理。
